تعیین فلورغالب قارچی و باکتریایی ریزوسفر و شناسایی ریز ساز واره‌های مولد آنزیم فسفولیپاز و کیتیناز در خاک‌های حاصلخیز ایرانشهر
الموضوعات : پژوهش های زراعی در حاشیه کویرهادی حسینی 1 , ایمان هرمزی 2 , نجمه شکیب 3
1 - باشگاه پژوهشگران جوان، دانشگاه آزاد اسلامی، زاهدان، زاهدان-ایران
2 - کارشناس آزمایشگاه تشخیص طبی
3 - کارشناس آزمایشگاه تشخیص طبی
الکلمات المفتاحية: قارچ, باکتری, فسفولیپاز, کیتیناز و آنزیم,
ملخص المقالة :
این پژوهش با هدف شناسایی و جدا سازی باکتری ها و قارچ های مولد آنزیم های فسفو لیپاز و کیتیناز در خاک منطق حاصلخیز ایرانشهر جهت شناسایی و تولید کود بیولوژیک برای استفاده ی کشاورزان استان با استفاده از ریزسازواره های سازگار با شرایط جغرافیایی منطقه (هدف ثانویه) انجام پذیرفت.نمونه گیری از خاک مزارع کشاورزی مناطق حاصلخیز شهر ایرانشهر بوده و خاک مناطق نمونه برداری به میزان 5+10 رقیق سازی شدند.در ادامه جهت خالص سازی به محیط های عمومیPda و Nutrient agarمنتقل گردیدند.برای سوبسترای کیتین، کیتین میگو از کمپانی سیگما آلدریچ آمریکا و برای سوبسترای فسفولیپاز از زرده ی استریل تخم مرغ استفاده شد.پس از ادغام سوبسترا های اختصاصی با محیط های عمومی، ریز ساز واره های آنزیم مثبت از طریق تولید هـاله شناسایی و جدا سازی شدند که در بین قارچ ها، قارچ موکور و در بین باکتری ها سودوموناس در صـدر قرار داشتند.آنزیم ها با تـست اسپکتوفتـومتری و سنـجش میزان جذب نوری در طـول موج های 410 و 280 نانو متر شناسایی و تاییـد شـدند.در این تسـت محـیط ها به صورت مایـع تـهیه و به عنوان بـلانک استفاده شـد و محیط های حاوی آنزیم جهت خالـص سازی از فیلتر های میکروبی عبور داده شدند. نمونه ها جهت شـناسایی مولکولی به شرکت میـکروژن کره جنوبی ارسـال گردیدند که پاسخ تست های شنـاسایی مولکولی نیز تایید کننده ی تست های بیو شیمیایی و مورفولوژیک بود.باکتری و قارچ غالب تولید کننده ی آنزیم فسفولیپاز به ترتیبBacillussubtilis و Mucorhiemalisبودند، همچنین بیش ترین میزان تولید آنزیم کیتیناز نیز در ریزسازواره هایPseudomonasputidaو Mucorhiemalisمشاهده شد. تغییراتpHنشان داد افزایشpHبه سمت قلیایی باعث کاهش شدید ترشح آنزیم میشود. بیش ترین میزان تولید هر دو آنزیم در قارچMucorhiemalisدیده شد.
_||_
