بررسی توان تولید مناکوئینون 7 (ویتامین K) و ناتوکیناز در دو سویه وحشی و کلکسیونی باسیلوس سوبتیلیس ناتو
الموضوعات :
1 - دانشگاه آزاد
الکلمات المفتاحية: باسیلوس سوبتیلیس ناتو, , مناکوئینون 7, ویتامین K, ناتوکیناز, غذای تخمیری,
ملخص المقالة :
سابقه و هدف: باسیلوس سوبتیلیس ناتو به واسطه قدرت بالا در تولید مناکوئینون 7 (ویتامین K) و همچنین آنزیم ناتوکیناز یک سویه میکروبی ارزشمند در زیست فناوری دارویی است. شرکت های دارویی و تولید کنندگان مکمل های غذایی از این سویه جهت تولید صنعتی این ترکیبات استفاده می نمایند. اما علی رغم اهمیت کاربردی باسیلوس سوبتیلیس ناتو در صنایع دارویی، در ایران تنها یک سویه کلکسیونی از این باکتری در دسترس است. با توجه به این که نگهداری کلکسیونی درازمدت ممکن است بر ویژگی های فیزیولوژیک باکتری ها تاثیر منفی داشته باشد، بر آن شدیم تا توان این سویه را در تولید محصولات زیستی با سویه وحشی باسیلوس سوبتیلیس ناتو مقایسه نماییم. مواد و روشها: با خرید استارتر ناتو از شرکتهای بین المللی و وارد کردن آن به کشور، غذای تخمیری ژاپنی ناتو تهیه شد. با رقیق سازی سوسپانسیون ناتو و کشت آن، باکتریهای مورد نظر جداسازی و خالص سازی شد. کلونی های مشکوک به باسیلوس سوبتیلیس بر اساس ریخت شناسی کلونی، رنگ آمیزی های گرم و اسپور جداسازی شدند. در مرحله بعد آزمونهای بیوشیمیایی از قبیل مصرف سیترات، هیدرولیز نشاسته، هیدرولیز ژلاتین، تولید سولفید هیدروژن، تحمل نمک، کاتالاز، ووگس-پروسکوئر (V-P)، تخمیر گلوکز، تخمیر مانیتول و احیای نیترات بر روی جدایه ها انجام شد. شناسایی مولکولی به روش توالی یابی ژن rRNA 16s انجام شد و توالی بدست آمده در پایگاه اطلاعاتی NCBI به ثبت رسید. نهایتا توانایی باسیلوس سوبتیلیس ناتو وحشی جهت تولید مناکوئینون 7 و ناتوکیناز با توان سویه کلکسیونی در تولید این ترکیبات مقایسه گردید. یافته ها: نتایج به دست آمده از آزمون های ریخت شناسی کلونی، رنگ آمیزی ها، آزمونهای بیوشیمیایی و شناسایی مولکولی تائید نمود که سویه جداسازی شده باسیلوس سوبتیلیس ناتو می‌باشد. میزان مناکوئینون 7 تولید شده توسط این سویه و سویه کلکسیونی تفاوت معنی داری نشان نداد. قدرت تولید ناتوکیناز در سویه وحشی نسبت به سویه کلکسیونی به طور معنی داری بیشتر بود. نتیجه گیری: نگهداری دراز مدت باسیلوس سوبتیلیس ناتو در کلکسیون های میکروبی خارج از کشور و پس از آن در کلکسیون های داخلی موجب شده است که توان این سویه در تولید محصولات دارویی ارزشمند به شدت کاهش یابد. البته این نتیجه گیری نمی تواند به طور قطع صحیح باشد زیرا ممکن است سویه کلکسیونی که در ایران در دسترس است از ابتدا یک سویه ضعیف از نظر تولیدات دارویی بوده باشد. با توجه به اهمیت سویه های صنعتی در تولید محصولات با ارزش بعید نیست که کلکسیون های میکروبی خارج از کشور سویه با توان بالای تولید را در اختیار دیگر کشورها قرار نداده باشند. لذا تلاش خواهد شد تا سویه وحشی باسیلوس سوبتیلیس ناتو که دارای توان قابل توجهی در تولید مناکوئینون 7 و ناتوکیناز می باشد در کلکسیون های میکروبی داخلی سپرده گذاری گردد تا در اختیار فناوران و پژوهشگران ایرانی قرار گیرد.
