مقایسه دو روش هیستوپاتولوژی و Multiplex-PCR در تشخیص بیماری یرسینیوز (Yersinia ruckeri) در تعدادی از مزارع پرورشی ماهیان قزل‌آلای کشور

الموضوعات : پاتوبیولوژی مقایسه ای

عادل حقیقی خیابانیان اصل ¹ (ندارد)
محمدرضا روزبهانی ² (ندارد)
بهرام کاظمی ³ (ندارد)

تاريخ الإرسال : 21 السبت , رجب, 1431 تاريخ التأكيد : 28 الخميس , شوال, 1431 تاريخ الإصدار : 06 السبت , ربيع الأول, 1431

الکلمات المفتاحية: هیستوپاتولوژی, Multiplex- PCR- (ERM) یرسینیوز, قزل‌آلا, ایران,

ملخص المقالة :

یرسینیا راکری عامل بیماری دهان قرمز روده‌ای (Enteric red mouth disease) آبزیان است که سالانه موجب خسارات هنگفتی به صنعت آبزی‌پروری و کشاورزی در ایران و جهان می‌گردد. تشخیص قطعی، سریع و اقدام موثر برای بیماری‌هایی مانند یرسینیوز که شیوع شان در مراکز پرورش قزل‌آلا بسیار سریع است، از اهمیت ویژه‌ای برخوردار است. هدف از این تحقیق مقایسه دو روش تشخیصی هیستوپاتولوژی و Multiplex- PCR در تشخیص بیماری یرسینوز یا بیماری دهان قرمز روده‌ای(ERM) در ماهی قزل‌آلا در ایران است. در این مطالعه در آزمایشات مبتنی بر PCR ، DNA مورد استفاده در هر واکنش PCR از بافت ماهی‌های قزل‌آلای مشکوک به بیماری استخراج و محصول واکنشPCR، با استفاده از ژل الکتروفورز روئیت ‌گردید. در پایش پاتولوژی، از بافت ماهی‌های زنده یا در حال مرگ فیکس شده در محلول فرمالین 10% سالین استفاده شده است. سپس نمونه‌ها در قالب‌های پارافین تثبیت و بوسیله میکروتوم‌های دیجیتال به ضخامت 7-5 میلیمتر برش داده شدند. اسلایدهای آماده شده بوسیله هماتوکسیلین ـ ائوزین رنگ‌آمیزی شده و مورد بررسی قرار گرفتند. در این تحقیق 20 نمونه مشکوک که علائم بالینی مشخص از قبیل سپتی سمی حاد در بافت‌های داخلی و وخونریزی سطحی در اطراف دهان و مقعد از خود بروز می‌دادند، با تکنیک‌های یاد شده مورد ازمایش قرار گرفتند که بر طبق نتایج آزمایشات مولکولی، در نمونه‌های منفی تنها قطعه مربوط به ژن میزبان به عنوان کنترل واکنش PCR تکثیر شده است، که خود این مسئله صحت انجام آزمایش مولکولی را تایید می‌نماید، در مقابل در نمونه‌های مثبت، توالی‌های ژنی میزبان و همچنین پاتوژن یرسینیا هر دو آمپلی فای و تکثیر شده‌اند که بیان کننده تشخیص عامل پاتوژن می‌باشد. از مجموع 20 نمونه مورد آزمایش به روش PCR در مجموع 2 مورد مثبت و 18 مورد، منفی گزارش شد در مقابل در آزمایشات هیستوپاتولوژی از نمونه‌های مذکور 5 مورد مثبت و دارای علایم آسیب‌شناسی تیپیک و مشخص بیماری یرسینیوز و 15 مورد، منفی و بدون هیچ‌گونه علایم منتسب به بیماری گزارش شد.