بررسی برخی خصوصیات ژنی جدایههای بومی باکتری Bacillus thuringiensis از خاکهای مناطق جنگلی استان گلستان
الموضوعات :مرضیه شازده احمدی 1 , سید افشین سجادی 2 , زینالعابدین شهادتی مقدم 3
1 - محقق گروه بیوتکنولوژی مرکز تحقیقات و آموزش توتون تیرتاش
2 - محقق، گروه گیاهپزشکی، مرکز تحقیقات و آموزش تیرتاش، بهشهر، ایران
3 - محقق، گروه گیاهپزشکی، مرکز تحقیقات و آموزش تیرتاش، بهشهر، ایران
الکلمات المفتاحية: Bacillus thuringiensis, شناسایی مولکولی, پروتئین کریستالی, ژنهای Cry و Vip,
ملخص المقالة :
جدایه های بومی باکتری Bacillus thuringiensis (Bt) از خاک های مناطق جنگلی شهرستان های مختلف استان گلستان جدا سازی و ژن Cry و Vip عامل تولید توکسین و پروتئین مؤثر روی حشرات در آن ها ردیابی شد. از کل 42 نمونه خاک مورد بررسی از طریق بازدارندگی انتخابی استات سدیم، تعداد 160 جدایه Bt جدا سازی گردید. پس از کشت کلنی ها، رنگ آمیزی اختصاصی و شناسایی میکروسکوپی در 40 درصد از جدایه ها انجام شد، پروتئین کریستالی کشنده برای بسیاری از حشرات مشاهده گردید. بررسی مولکولی جدایه های Bt نشان داد که در 12 جدایه ژن هایCry و Vip وجود داشتند. آزمایشات تعیین ساختار ژنی برای وجود سه ژن Cry 1A (شامل Cry1Aa, Cry1Ab, Cry1Ac) و ژن های Cry1I، Cry1F، Cry2، Cry9 و Vip3Aa با استفاده از 8 جفت آغاز گر اختصاصی انجام شد. ژن های Cry1Ab، Cry2 و Cry1F در همه جدایه ها مشاهده شد، ولی ژن های Cry1Aa، Cry1I و Cry1Ac فراوانی بسیار کم (کم تر از 20 درصد) داشتند و یا در هیچ یک از جدایه ها یافت نشدند. نتایج این تحقیق می تواند برای ردیابی جدایه های بومی باکتری Bt که دارای پروتئین های کریستالی مؤثر روی حشرات هستند، مفید واقع شود.
_||_