کلون سازی و تعیین توالی ژن هورمون رشد گوسفند نژاد لری بختیاری

الموضوعات :

مهدی دیانی نیا ¹ , مرتضی کریمی پور ² , وهاب باباپور ³ , لهراسب شاهقلیان ⁴ , عباس دوستی ⁵

1 - مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد شهرکرد، شهرکرد، ایران
2 - مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
3 - دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران
4 - مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد شهرکرد، شهرکرد، ایران
5 - مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد شهرکرد، شهرکرد، ایران

تاريخ الإرسال : 07 السبت , شوال, 1430 تاريخ التأكيد : 23 السبت , شوال, 1431 تاريخ الإصدار : 08 السبت , جمادى الثانية, 1431

الکلمات المفتاحية: هورمون رشد, گوسفند نژاد لری بختیاری, کلون سازی,

ملخص المقالة :

هورمون رشد باعث تحریک رشد و تکثیر سلول ها در انسان و حیوانات می شود. این هورمون یک پلی پپتید تک زنجیره ای با 191 اسید آمینه است که در سلول های سوماتوتروف واقع در بال جانبی غده هیپوفیز پیشین ساخته شده و ذخیره و ترشح می گردد. هدف از این تحقیق کلون سازی و تعیین توالی ژن هورمون رشد گوسفند نژاد لری بختیاری برای اولین بار در ایران می باشد. به منظور کلون سازی و تعیین توالی ژن هورمون رشد گوسفند نژاد لری بختیاری، RNA از غده هیپوفیز گوسفند تازه کشتار شده، استخراج و cDNA هورمون رشد ساخته شد. با استفاده از روش کلون سازی T/A، قطعه cDNA هورمون رشد کلون شد و سپس به باکتری E. coli به عنوان میزبان منتقل گردید. تأیید صحت کلون های به دست آمده با روش های PCR، هضم آنزیمی و تعیین توالی انجام گرفت. کلون سازی cDNA ژن هورمون رشد گوسفند نژاد لری بختیاری با موفقیت انجام شد و توالی ژن کد کننده هورمون رشد گوسفند با طول690 جفت باز مشخص گردید. مقایسه توالی ژن هورمون رشد موجود در پلاسمید نوترکیب ساخته شده با رکوردهای ثبت شده در بانک ژن جهانی، نشان دهنده شباهت بسیار زیادی بین توالی هورمون رشد گوسفند بومی ایران با سایر نژادهای دنیا می باشد.

المصادر:

1. بیگدلی، م.ر. 1381. مروری بر فیزیولوژی پزشکی گانونگ. چاپ اول، انتشارات تیمورزاده، صفحات: 251 و 295-286.
   
   
   1. Agellon, E., Sise, J.A., Penty, J.M. and Montgomery, G.W. 1993. The duplicated gene copy of ovine growth hormone gene contains a P. vull polymorphism in the second intron. Animal generics. 24:319-321.
   
   
   2. Brenner, C.A., Tam, A.W., Nelson, P.A., Engeman, E.G., Suzuki, N., Fry, K.E. et al. 1989. Novel method for studying mRNA phenotypes in single or small numbers of cells. Biotechniques. 7(10):1096-1103.
   
   
   3. Dellacha, J.M., Enero, M.A., Sentome, J.A. and Palodini, A.C. 1970. Isolation, characterization and C-Terminal sequence of ovine growth hormone. European Journal of Biochemistry. 12:289-295.
   
   
   4. Guron, C., Roa, K.B., Jain, S.K., Totey, S.M. and Talwar, G.P. 1992. Cloning and nucleotide sequencing of sheep growth hormone cDNA. Indian Journal of Experimental Biology. 30(8):659-63.
   
   
   5. Fleming, J.S., Suttee, J.M., Montgonery, G.W., Gwnn, J., Stuart, S.K., Little john, R.P. et al. 1997. The effects of duplication in the ovine growth hormone (GH) gene on GH expression in the pituitaries of ram lambs from lean and fat-selected sheep line. Domestic Animal Endocrinology. 14:17-24.
   
   

 

1. Lacroix, M.C., Devinoy, E., Servely, L., Pulssant, C. and Kann, T. 1996. Expression of the growth hormone gene in ovine placents: detection and cellular localization of the protein. Journal of Endocrinology. 137:4886-4892.


2. Orian, J.M., O’Mahoneg, J.V. and Brandon, M.R. 1988. Cloning and sequencing of ovine growth hormone gene. Nucleic Acids Reserch. 16:9046.


3. Sch-lee, P., Grami, R., Schallenberger, E. and Scham, S.D. 1994. Growth hormone and Insulin-like growth Factor I concentrations in bulls of various growth hormone genotypes. Theoretical and Applied Genetics. 88:497-500.


4. Tashjian, A.H., Bancroft, F.C. and Levince, L. 1970. Hormone production cell culture model. Journal of Cell Biology. 47:61-70.


5. Valinsky, A., Shani, M. and Gootwine, E. 1990. Restriction fragment length polymorphism in sheep at the growth hormone locus is the result of variation in gene number. Animal Biotechnology. 1:135-144.


6. Wallis, M. 1994. Variable evolutionary rates in the molecular evolution of mammalian growth hormone. Journal of Molecular Evolution. 38:619-627.


7. Warwick, J.M. and Wallis, M. 1984. Characterization of mRNA sequences encoding sheep somatotropin (growth hormone) by cloning of pituitary complementary DNA. Biochemical society Transactions. 12:247-250.


8. Warwick, J.M., Wallis, O.C. and Wallis, M. 1989. Cloning, sequence and expression in Escherichia coli of cDNA. Biochimica et Biophysica Acta. 1008:247-250.