بررسی چند شکلی ژن SCD1 (Stearoyl-CoA Desaturase Gene) در جمعیت گاومیش استان خوزستان با استفاده از تکنیک PCR-RFLP

Subject Areas : Camel

ک. تقی‌زاده ¹ (Department of Animal Science, Ramin Agricultural and Natural Resources University, Mollasani, Ahvaz, Iran)
م.ت. بیگی نصیری ² (Department of Animal Science, Ramin Agricultural and Natural Resources University, Mollasani, Ahvaz, Iran)
ج. فیاضی ³ (Department of Animal Science, Ramin Agricultural and Natural Resources University, Mollasani, Ahvaz, Iran)
م. بوجارپور ⁴ (Department of Animal Science, Ramin Agricultural and Natural Resources University, Mollasani, Ahvaz, Iran)

Received: 2013-06-14 Accepted : 2013-08-01 Published : 2014-06-01

Keywords: PCR-RFLP, MUFA, گاومیش, تعادل هاردی-وینبرگ, ژن SCD1,

Abstract :

استرول کوآنزیم آ دسچوراز(SCD)، آنزیم محدودکننده در بیوسنتز اسیدهای چرب با یک پیوند دوگانه (MUFA) می‌باشد. شماری از مطالعات این فرضیه را تأیید می‌کند که چند شکلی و تنظیم ژن SCD، ممکن است بر ترکیب اسیدهای چرب و کیفیت چربی گوشت و شیر مؤثر باشد. پلی‌مورفیسم‌های تک نوکلئوتیدی در ناحیه‌ی کدکننده‌ی ژن SCD1 گاوی نشان داده است که در موقعیت A293V اسید آمینه والین به جای اسید آمینه آلانین جایگزین شده و در نتیجه آلل‌های A و V در این لوکوس مشخص گردید. هدف از این تحقیق، بررسی چند شکلی ژن SCD1 برای اولین‌ بار در جمعیت گاومیش بود. از جمعیت گاومیش خوزستان، از تعداد 85 نمونه گاومیش از شهرهای شوشتر، دزفول، دشت ‌آزادگان و شادگان خون‌گیری به عمل آمد. استخراج DNA با استفاده از کیت DIAtom DNA perp صورت گرفت. با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و تکنیک PCR قطعه 400 جفت بازی اگزون 5 ژن SCD1 تکثیر یافت. سپس محصولات PCR با استفاده از آنزیم محدودکننده‌ی NCO1 و متد  PCR-RFLPمورد هضم آنزیمی قرار گرفت. به کمک الگوهای باندی بر روی ژل آگارز 3 درصد و رنگ آمیزی با اتیدیدیوم بروماید، تمامی نمونه‌ها تعیین ژنوتیپ شدند‌. نتایج حاصل از باندهای الکتروفورزی نشان داد که هیچ‌ گونه تفاوت ژنتیکی در بین حیوانات مورد مطالعه در این ناحیه از ژن با آنزیمNCO1  مشاهده نگردید. همچنین نتایج حاصل از این تحقیق، عدم وجود تعادل هاردی-واینبرگ را برای جایگاه SCD1 نشان داد.

References:

Arnould V.M.R. and H. Soyeurt (2009). Genetic variability of milk fatty acids. J. Appl. Genet. 50, 29-39.
Camargo G.M.F., Thomazin R.B., Boarini F.G. and Tonhati H. (2007). Use of PCR-RFLP (polymerase chain reaction-restricted fragment length polymorphism) in the gene of the enzyme Stearoyl-CoA-desaturase in Bubalus bubalis. J. Anim. Sci. 6, 307-309.
Campbell E.M.G., Gallagher D.S, Davis K.S., Taylor J.F. and Smith S.B. (2001). Rapid communication: mapping of the bovine stearoyl coenzyme A desaturase (SCD) gene to BTA26. J. Anim. Sci. 79, 1954-1955.
Conte G.M., Mele S., Chessa B., Castiglioni A., Serra G., Pagnacco G. and Secchiari P. (2010). Diacylglycerol acyltransferase 1, stearoyl-CoA desaturase 1, and sterol regulatory element binding protein 1 gene polymorphisms and milk fatty acid composition in Italian Brown cattle. J. Dairy Sci. 93, 753-763.
Dobrzyna A. and Ntambi J.M. (2005). The role of stearoyl-CoA desaturase in the control of metabolism. Prost. Leuk. Essent. Fatty Acids. 73, 35-41.
Grummer R.R. (1991). Effect of feed on the composition of milk fat. J. Dairy Sci. 74, 3244-3257.
Hu F.B., Manson J.E. and Willet W.C. (2001). Types of dietary fat and risk of coronary heart disease: a critical review. J. Am. Coll. Nutr. 20, 5-19.
Kgwatalala P.M., Ibeagha-Awemu E.M., Hayes J.F. and Zhao X. (2007). Single nucleotide polymorphisms in the open reading frame of the stearoyl-CoA deasturase gene and the resulting genetic variants in Canadian Holstein and Jersey cows. DNA Sequence. 18, 357-362.
Kgwatalala P.M., Ibeagha-Awemu E.M., Mustafa A.F. and Zhao X. (2009). Influence of stearoyl-coenzyme A desaturase 1 genotype and stage of lactation on fatty acid composition of Canadian Jersey cows. J. Dairy Sci. 92, 1220-1228.
Keating A.F., Kennelly J.J. and Zhao F. (2006). Characterization and regulation of the bovine stearoyl-CoA desaturase gene promoter. Biochem. Biophys. Res. Commun. 344, 233-240.
Mainieri D., Summermatter S., Seydoux J., Montani J.P., Rusconi S., Russell A.P., Boss O., Buchala A.J. and Dulloo A.G. (2006). A role for skeletal muscle stearoyl-CoA desaturase 1 in control of thermogenesis. Fed. Am. Soc. Exp. Biol. J. 20(10), 1157-1170.
Mauvoisin D. and Mounier C. (2011). Hormonal and nutritional regulation of SCD1 gene expression. Biochimie. 93, 78-86.
Moioli B., Contarini G., Avalli A., Catillo G., Orru L., De Matteis G., Masoero G. and Napolitano F. (2007). Short communication: effect of stearoyl-Coenzyme A desaturase polymorphisms on fatty acid composition of milk. J. Dairy Sci. 90, 3553-3558.
Moore J.H. and Christie W.W. (1979). Lipid metabolism in the mammary gland of ruminant animal. Prog. Lipid Res. 17, 347-395.
Ntambi J.M. and Miyazaki M. (2004). Regulation of stearoyl-CoA desaturases and role in metabolism, Prog. Lipid Res. 43, 91-104.
Ntambi J.M., Miyazaki M., Stoehr J.P., Lan H., Kendziorski C.M., Yandell B.S., Song Y., Cohen P., Friedman J.M. and Attie A.D. (2002). Loss of stearoyl-CoA desaturase 1 function protects mice against adiposity. Proc. Natl. Acad. Sci. 99(17), 11482-11486.
Schennink A., Heck J.M.L., Bovenhuis H., Visker M.H.P.W., van Valenberg H.J.F. and van Arendonk J.A.M. (2008). Milk fatty acid unsaturation: genetic parameters and effects of stearoyl-CoA desaturase 1 (SCD1) and acyl-CoA: diacylglycerol acyltransferase 1 (DGAT1). J. Dairy Sci. 91, 2135-2143.
Taniguchi M., Utsugi T., Oyama K., Manna H., Kobayashi M., Tanab Y., Ogino A. and Tsuji S. (2004). Genotype of stearoyl-CoA desaturase is associated with fatty acid composition in Japanese Black cattle. J. Mamm. Gen. 14, 142-148.