ردیابی و تعیین جایگاه تاکسونومیک باکتری همزیست ولباکیا در کرم گلوگاه انار در استان فارس

محورهای موضوعی : میکروب شناسی مولکولی

آیدا پیوستگان ¹ (کارشناس ارشد، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات، فارس، گروه حشره شناسی)
علی پاک نیت ² (استادیار، مرکز تحقیقات کشاورزی و منابع طبیعی فارس، زرقان)
هادی استوان ³ (استاد، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات، فارس، گروه حشره شناسی)
مرتضی الهیاری ⁴ (استادیار، مرکز تحقیقات کشاورزی و منابع طبیعی فارس، زرقان)

تاریخ دریافت : 1392/06/13 تاریخ پذیرش : 1392/09/04 تاریخ انتشار : 1393/08/10

کلید واژه: تاکسونومی, کرم گلوگاه انار, ژن wsp, ولباکیا,

چکیده مقاله :

سابقه و هدف: کرم گلوگاه انار، لارو شب پره اکتومیلویس سراتونیا می باشد که از مهم ترین آفات انار محسوب می گردد. در حال حاضر هر گونه عملیات سم پاشی بر علیه این آفت فاقد نتیجه بود است. یکی از روش های کنترل استفاده از عوامل بیولوژیک مانند ایجاد تغییرات تولید مثلی توسط باکتری ولباکیا است. این مطالعه با هدف ردیابی باکتری همزیست ولباکیا در کرم گلوگاه انار و تعیین جایگاه تاکسونومیکی آن در استان فارس انجام شد. مواد و روش ها: در این پژوهش به صورت تصادفی 100 نمونه از انارهای آلوده مناطق مختلف استان فارس جمع آوری گردید. پس از استخراج DNA از تخمدان حشره، به منظور ردیابی و وجود باکتری همزیست ولباکیا از روش PCR استفاده شد. پس از تعیین توالی قطعه حاصل و مقایسه آن با توالی های موجود در بانک ژن جهانی، جایگاه تاکسونومیکی ولباکیا با استفاده از نرم افزارهای ‍ClustalX وTreeView تعیین گردید. یافته ها: در این مطالعه تنها یک جمعیت از شیراز آلودگی به ولباکیا را نشان داد. پس از تکثیر ژن wsp، محصول یک قطعه 513 جفت بازی بود که به دنبال تعیین توالی با شماره دسترسی KF007903 در بانک جهانی ژن ثبت گردید. با مقایسه توالی به دست آمده و توالی موجود در بانک ژنی مشخص گردید که این باکتری در زیر گروه Fur8 از گروه B متعلق به ولباکیا پیپینتیس قرار دارد. نتیجه گیری: مطالعه حاضر اولین گزارش وجود ولباکیا در کرم گلوگاه انار در ایران و جهان می باشد. از آنجایی که نمونه برداری در فاصله زمانی تیر تا شهریور ماه انجام پذیرفته است، بنابراین شیوع کم باکتری ولباکیا در مناطق مورد بررسی را می توان به احتمال اثر دما به عنوان یک عامل بازدارنده رشد باکتری در حشرات نسبت داد.

چکیده انگلیسی:

Background & Objectives: Ectomyelois ceratoniae is one of the main pests of pomegranate. By now, no pesticides showed efficient effects on this pest. Biological control, such as changes in the reproduction ability, is a new emerged strategy for control of the population of this pest. This study was aimed to identify the symbiont bacteria in Ectomyelois ceratoniae and to determine their taxonomic classification. Materials & Methods: In this study, totally 100 infected pomegranate were randomly collected from different parts of Fars providence. After DNA extraction from ovum of the insects, a PCR approach was used to identify any symbiont bacteria in this samples. Following sequencing of the products and their analysis on gene banks, the taxonomic classification of Wolbachia was determined using ClusalX and TreeView. Results: In this study only one sample collected from shiraz was contaminated to Wolbachia . After amplification of wsp gene, OCR produced a 513 bp fragment which is available in gene bank under accession number KF007903. Analysis of the fragment in gene bank showed that this bacterium belonged to subclass Fur8 from group B, referred to as Wolbachia pipientis. Conclusion: According to our knowledge, the present study is the first report of the presence of Wolbachia in E. ceratoniae. Since the sampling were performed through June to August, the low prevalence of the bacterium Wolbachia sp. in these area can be due to effects of temperature, which is an inhibitory factor for growth of the bacterium in the insect.