الگوی ژن‌های حدت استافیلوکوکوس اورئوس جدا شده از موارد ورم پستان تحت بالینی و بالینی در استان البرز

محورهای موضوعی : پاتوبیولوژی مقایسه ای

هادی پورتقی . ¹ (.)

تاریخ دریافت : 1395/11/24 تاریخ پذیرش : 1395/11/24 تاریخ انتشار : 1396/04/01

کلید واژه: گاو شیری, استافیلوکوکوس اورئوس, ژن‌های حدت, ورم پستان بالینی و تحت بالینی,

چکیده مقاله :

هدف از انجام مطالعه حاضر شناسایی ژن های حدت در استافیلوکوکوس اورئوس‌های جدا شده از موارد ورم پستان تحت بالینی و بالینی بود. جهت شناسایی موارد ورم پستان تحت بالینی تعداد 1920 کارتیه مربوط به 480 گاو در هفت گاوداری در استان البرز به وسیله شیرآزما (CMT) مورد ارزیابی قرار گرفت. همچنین به کمک کشت باکتریایی موارد بالینی ورم پستان استافیلوکوکوس ورئوس نیز مورد ارزیابی قرار گرفت. بر اساس آزمایش کواگولاز و ژن 23srDNA به ترتیب تعداد 33 و 12 سویه استافیلوکوکوس اورئوس از موارد ورم پستان تحت بالینی و بالینی جدا شدند. به کمک PCR که با استفاده از پرایمرهایی که برای ژن های فاکتور توده ای کننده (clfA)، کواگولاز (coa)، ناحیه X کد کننده پروتئین A (SpaA- X region)، ژن تنظیم کننده فرعی (agrIII)، همولیزین A (hla) و همولیزین B (hlb)، انجام شد، استافیلوکوک های جدا شده از نظر ژنتیکی مورد ارزیابی قرار گرفتند. با توجه به تنوع بالا در ژن های مورد مطالعه 17 پروفایل مختلف در بین نمونه های مورد مطالعه مشاهده شد که این امر حاکی از تنوع بالا در استافیلوکوکوس اورئوس های دخیل در ورم پستان در این منطقه از کشور است. پروفایل غالب در بین موارد تحت بالینی و بالینی مربوط به clfA, coa, agrIII بود. نتایج این مطالعه امکان بررسی تنوع چند ژن حدت در سویه های استافیلوکوکوس اورئوس شایع در ورم پستان های تحت بالینی و بالینی در استان البرز را فراهم کرده و ممکن است در جهت تبیین رویکردی پیشگیرانه درجهت کاهش عفونت ناشی از این باکتری کمک کننده باشد.

چکیده انگلیسی:

The aim of this study was to determine virulence genes patterns of Staphylococcus aureus isolated from bovine subclinical and clinical mastitis. A total of 1,920 quarters of 480 dairy cattle in seven commercial dairy farms of Alborz province, Iran examined using CMT test. Staphylococcus aureuses were detected from clinical and subclinical samples with bacteriological culture. Based on coagulase reaction and 23sr DNA, a total of 33 and 12 strains of Staphylococcus aureus were isolated from subclinical and clinical mastitis cases respectively. The Staphylococcus aureus strains were characterized genotypically by polymerase chain reaction using oligonucleotide primers that amplified genes encoding clumping factor (clfA), coagulase (coa), the gene segments encoding the X region of protein A gene spa (SpaA-X), accessory gene regulator (agrIII), hemolysin A (hla), and hemolysin B (hlb). Based on a remarkable variability detected in the studied genes 17 different profiles were identified among the samples, indicating a great diversity of Staphylococcus aureus involved in the etiology of mastitis cases in this region. The predominant profile between subclinical and clinical cases was clfA, coa, agrIII. These results help in the understanding of the distribution of the prevalent Staphylococcus aureus strains among bovine subclinical and clinical mastitis isolates in Alborz province, and might contribute to the establishment of preventive strategies to decrease the spread of infection.

منابع و مأخذ:

1. Adhikari, R.P., Cook, G.M., Lamont, I., Lang, S., Heffernan, H., Smith, J.M.B. (2002): Phenotypic and molecular characterization of community occurring, Western Samoan phage pattern methicillin-resistant Staphylococcus aureus. J. Antimicrob. Chemother. 50:825-831.

 

2. Akineden, O., Annemüller, C., Hassan, A.A., Lämmler, C., Wolter, W., Zschöck, M. (2001): Toxin genes and other characteristics of Staphylococcus aureus isolates from milk of cows with mastitis. Clin. Diagn. Lab. Immunol.8:959-964.

 

3. Bownik, A., Siwicki, A.J. (2008): Review paper: Effects of staphylococcal hemolysins on the immune system of vertebrates. Centr. Eur. J. Immunol. 33:87-90.

 

4. Coelho, S.M.O., Pereira, I.A., Soares, L.C., Pribul, B.R., Souza, M.M.S. (2011): Profile of virulence factors of Staphylococcus aureus isolated from subclinical bovine mastitis in the state of Rio de Janeiro, Brazil. J. Dairy. Sci. 94(7):3305-3310.

 

5. Franco, G., Julio, C., González L.V., Sandra, C., Gómez, M., Juan, M., Carrillo, G., José, J., Ramírez, C. (2008): Virulence factors analysis of Staphylococcus aureus isolated from bovine mastitis in México. e-Gnosis. 6(7):1-7.

 

6. Frenay, H., Bunschoten, A.E., Schouls, L.M., van Leeuwen, W.J., Vandenbroucke-Grauls, C.M., Verhoef, J., Mooi, F.R. (1996): Molecular typing of methicillin-resistant Staphylococcus aureus on the basis of protein a gene polymorphism. Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. 15:60-64.

 

7. Gilot, P., Lina, G., Cochard, T., Poutrel, B. (2002): Analysis of the genetic variability of genes encoding the RNA III-activating components Agr and TRAP in a population of Staphylococcus aureus strains isolated from cows with mastitis. ‎J. Clin. Microbiol. 40:4060-4067

 

8. Huijps, K., Lam, T.J., Hogeveen, H. (2008): Costs of mastitis: facts and perception. J. Dairy. Res. 75:113-120.

 

9. International Dairy Federation. Bovine Mastitis. (1987): Definitions and guidelines for diagnosis. Dairy Federation. 211:3-8.

 

10. Kalorey, D.R., Shnmugam, T., Kurkure, N.V., Chousalkar, K.K., Barbudde, S.B. (2007): PCR-based detection of genes encoding virulence determinants in Staphylococcus aureus from bovine subclinical cases. ‎J. Vet. Sci. 2:151-154.

 

11. Karahan, M., Çetinkaya. B. (2007): Coagulase gene polymorphisms detected by PCR in Staphylococcus aureus isolated from subclinical bovine mastitis in Turkey. Vet. J. 174:428-431.

 

12. Khakpoor, M., Safarmashaei, S., Jafary, R. (2011): Study of milk extracted from cows related to Staphylococcus aureus by culturing and PCR. Glob. Vet. 7(6):572-575.

 

13. Novick, R.P., Ross, H.F., Projan, S.J., Kornblum, J., Kreiswirth, G., Moghazeh, S. (1993): Synthesis of staphylococcal virulence factors is controlled by a regulatory molecule. EMBO. J. 12:3967-3975.

 

14. Pourtaghi, H., Sodagari, H.R. (2016): Antimicrobial resistance of entrotoxigenic and non-entrotoxigenic Escherichia coli isolated from diarrheic calves in Iran. Int. J. Enteric. Pathog. 4(2):e34557..

 

 

15. Sharma, N., Singh, N.K., Bhadwal, M.S. (2011): Relationship of somatic cell count and mastitis: an overview. Asian. Australas. J. Anim. Sci. 24:429-438.

 

16. Straub, J.A., Hertel, C., Hammes, W.P. (1999): A 23SrDNA-targeted polymerase chain reaction-based system for detection of Staphylococcus aureus in meat starter cultures and dairy products. J. Food. Prot. 62:1150-1156.