بیماری یون (پاراتوبرکلوزیس) ناشی از باکتری مایکوباکتریوم اویوم پاراتوبرکلوزیس (Mycobacterium avium paratuberculosis; MAP) عفونت مزمن و پیشرونده ای بوده و به طور عمده نشخوارکنندگان را درگیر می سازد. این بیماری می تواند خسارات اقتصادی فراوانی را به صنعت دامپروری وارد سازد و ممکن است تهدیدی نیز برای بهداشت عمومی باشد، چون با انتقال از راه شیر و دیگر فراورده های دامی آلوده ممکن است انسان را نیز آلوده نماید. مقاومت و ایمنی در برابر بیماری یون، بیش تر به پاسخ ایمنی با واسطۀ سلولی مرتبط است. پروتئین شوک حرارتی 70 (heat shock protein70; HSP70) باکتری فوق، یکی از پروتئین های مهم آن می باشد که پاسخ ضد آن از دفع مدفوعی باکتری جلوگیری می کند. به‌منظور فراهم سازی تولید واکسن نوترکیب جهت مقابله با بیماری یون، در این مطالعه تولید HSP نوترکیب (recombinat HSP; rHSP) و بررسی ایمنی زایی آن در خرگوش مورد بررسی قرار گرفت. بدین منظور ژن hsp70 در پلاسمید pET-24a همسانه سازی گردید و پلاسمید نوترکیب حاصله به سویۀ BL21 باکتری اشریشیا کولای منتقل شد. بیان پروتئین فوق با استفاده از SDS-PAGE بررسی و صحت توالی نوکلئوتیدی با تعیین توالی، تأیید گردید. تزریق rHSP70 به خرگوش با تولید سطح بالایی از آنتی بادی ضدِّ آن همراه بود. بر اساس یافته ها، به نظر می رسد که آنتی بادی ضد rHSP70 را می توان در طراحی روش های تشخیصی بیماری و پروتئین نوترکیب تولیدشده را جهت تولید واکسن های نوترکیب مورد ارزیابی قرار داد. تفاصيل المقالة

سابقه و هدف: امروزه مایکوباکتریوم های غیرتوبرکلوزی (NTM)، به دلیل افزایش شیوع بیماری زایی و ظهور مقاومت های آنتی بیوتیکی اهمیت فراوان یافته اند. رایج ترین مایکوباکتریوم غیرسلی در ایران ، مایکوباکتریوم فورچوئیتوم می باشد. این مطالعه با هدف شناسایی مولکولی و بررسی تنوع ژنتیکی در میان جدایه های بالینی مایکوباکتریوم فورچوئیتوم در ایران با استفاده از روش RAPD-PCR انجام شد. مواد و روش ها: این مطالعه به صورت مقطعی- توصیفی بر روی 81 ایزوله NTM جداسازی شده از نمونه های مختلف بالینی انجام شد. به منظور شناسایی اولیه مایکوباکتریوم فورچوئیتوم از رنگ آمیزی اسیدفست و تست های رایج بیوشیمیایی استفاده گردید. جدایه ها با روش PCR تایید شدند و محصولات PCR به وسیله 3 آنزیم برش دهنده AvaII، HphI وHpaII هضم گردیدند. در نهایت تیپ بندی مولکولی جدایه های مایکوباکتریوم فورچوئیتوم به کمک آنالیز RAPD انجام شد. یافته ها: از مجموع 81 ایزوله NTM بررسی شده، 36 سویه به عنوان مایکوباکتریوم فورچوئیتوم شناسایی شدند. این سویه ها بر اساس پرایمرهای RAPD در 10 خوشه اصلی قرار گرفتند. بیشتر جدایه ها در رپید تایپ 1 (9 عضو ، 25%)، 2 (8 عضو ، 22.2%) و 6 (6 عضو ، 16.6%) طبقه بندی شدند. در آنالیز رپید، قطعه اصلی 300 جفت بازی (94.4%) و پس از آن قطعه 1000 جفت بازی (66.6%) وجود داشت. نتیجه گیری: نتایج مطالعه حاضر، قدرت تمایزی بالای RAPD-PCR را نشان می دهد. این آنالیز می تواند تنوع ژنتیکی و اطلاعات اپیدمیولوژیکی را در مورد جدایه های مایکوباکتریوم فورچوئیتوم ارائه دهد. آنالیز RAPD ساده، سریع، ارزان و پیچیدگی کمتری نسبت به سایر روش های تیپ بندی مولکولی دارد. تفاصيل المقالة