سابقه و هدف: باکتری استافیلوکوکوس اورئوس یکی از مهمترین عوامل عفونت‌زای بیمارستانی می‌باشد. اخیرا سویه‌های استافیلوکوکوس اورئوس نسبت به آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین مقاوم شده‌اند و پمپ افلاکس در این مقاومت نقش مهمی را ایفا می‌کند. هدف از این مطالعه، بررسی وجود ژن های پمپ افلاکس (norA و norB)، بیان و فعایت آن در سویه‌های مقاوم به سیپروفلوکساسین استافیلوکوکوس اورئوس بود .مواد و روش ها: در این مطالعه، تعداد 250 نمونه بالینی به منظور جداسازی سویه های استافیلوکوکوس اورئوس، بررسی مقاومت آنتی بیوتیکی، وجود و بیان ژن‌های پمپ افلاکس norA و norB در آنها به ترتیب توسط روش های PCR و real-time PCR مورد مطالعه قرار گرفت. در انتها، پمپ افلاکس فعال در سویه‌های مقاوم به سیپروفلوکساسین استافیلوکوکوس اورئوس توسط روش اتیدیوم بروماید بررسی شد.یافته ها: از مجموع نمونه های مورد برررسی، 50 سویه استافیلوکوکوس اورئوس جداسازی شد که از این میان 12 جدایه (24%) مقاوم به سیپروفلوکساسین بودند. میزان شیوع ژن های norA و norB در سویه‌های مقاوم به سیپروفلوکساسین به ترتیب 100% و 83% بود. همچنین تمامی سویه‌های مقاوم به سیپروفلوکساسین دارای پمپ افلاکس فعال بودند. نتایج real-time PCR نشان داد که اختلاف معنی داری در میزان بیان پمپ ‌های افلاکس در سویه‌های مقاوم به سیپروفلوکساسین وجود دارد. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد که پمپ‌های افلاکس norA و norB نقش مهمی در ایجاد مقاومت به سیپروفلوکساسین ایفا می‌کند. تفاصيل المقالة

سابقه و هدف: پمپ های افلاکس یکی از دلایل مهم مقاومت سویه های باکتریایی اسینتوباکتر بامانی به آنتی بیوتیک به شمار می آیند. هدف از این مطالعه، سنتز سبز نانوذرات نقره با استفاده از عصاره گیاه تلخه و بررسی اثرات ضدپمپ افلاکسی آن در جدایه های بالینی مقاوم به دارو اسینتوباکتر بامانی می باشد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، ابتدا نانوذرات نقره با استفاده از عصاره الکلی گیاه تلخه سنتز گردیدند. در ادامه ساختمان نانوذرات تولید شده توسط روش های اسپکتروفتومتری (UV-Vis)، تفرق اشعه ایکس (XRD)، میکروسکوپ الکترونی نگاره (SEM) و گذاره (TEM) تایید شدند. وجود پمپ افلاکس adeAC در 21 جدایه بالینی مقاوم به آنتی بیوتیک اسینتوباکتر بامانی توسط روش کارت ویل و واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) ارزیابی شد. در نهایت اثرات ضدپمپ افلاکسی نانوذرات نقره با روش حداقل غلظت بازدارنده (MIC) مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها: نانوذرات نقره سنتز شده توسط جذب بیشینه در طول موج 420 نانومتر در روش UV-Vis مورد تایید قرار گرفتند. تصاویر میکروسکوپ الکترونی SEM وTEM نشان داد که نانوذرات نقره کروی شکل و دارای میانگین اندازه 38.89 نانومتر می باشند. هم چنین نتایج XRD ساختار مکعبی نانوذره سنتز شده را تایید می کند. نتایج روش کارت ویل و PCR نشان داد که از میان 21 جدایه اسینتوباکتر بامانی، 12 سویه دارای پمپ افلاکس فعال هستند. همچنین، میزان MIC اتیدیوم بروماید در سویه های مقاوم به همراه نانوذرات نقره با کاهش همراه بود. نتیجه گیری: با توجه به اثرات ضدپمپ افلاکسی نانوذرات نقره سنتز شده در سویه های اسینتوباکتر بامانی به نظر می رسد که این نانوذره پتانسیل استفاده در صنایع دارویی را دارد اما مطالعات بیشتر در این زمینه مورد نیاز می باشد. تفاصيل المقالة

سابقه و هدف: اشریشیا کلی یوروپاتوژن (UPEC) یکی از مهمترین باکتری های بیماری زاست که باعث عفونت مجاری ادراری می شود و هنوز هیچ واکسن انسانی علیه آن ساخته نشده است. هدف از این مطالعه، ﺑﻬﯿﻨﻪ ﺳﺎزی بیان پروتئین ﻧﻮﺗﺮﮐﯿﺐ PapG به همراه پروتئین لنگری لاکتوباسیلوس به نام AcmA در اشریشیا کلی می باشد. ﻣﻮاد و روشﻫﺎ: ژن کدکننده PapG.AcmA در وکتور کلونینگ pEXA به صورت سنتتیک خریداری و در وکتور بیانی pET21a ساب کلون گردید. ﺑﯿﺎن ﭘﺮوﺗﺌﯿﻦ نوترکیب در میزبان بیانی اشریشیا کلی سویه اریگامی با روش SDS-PAGE و وسترن بلات مطالعه شد. تولید پروتئین فیوژن در مقیاس بالا تحت تاثیر ﺗﺮﮐﯿﺐ ﻣﺤﯿﻂ ﮐﺸﺖ، ﻏﻠﻈﺖﻫﺎی ﻣﺨﺘﻠﻒ IPTG به ﻋﻨﻮان اﻟﻘﺎﮔﺮ و زﻣﺎن اﻟﻘﺎ در ﺑﯿﺎن پروتئین ﻧﻮﺗﺮﮐﯿﺐ PapG.AcmA بهینهﺳﺎزی گردید. ﯾﺎﻓﺘﻪﻫﺎ: با توجه به نتایج ﺑﻬﺘﺮﯾﻦ بیان در مقیاس بالا، ﺗﻮﺳﻂ ﻏﻠﻈﺖ 0.1 میلی مولار IPTG در ﮐﺪورت ﻧﻮری OD600nm برابر با 3 تعیین ﺷﺪ. ﻣﺤﯿﻂ ﮐﺸﺖ ﭘﯿﭽﯿﺪه اﺻﻼح ﺷﺪه ﺣﺎوی گلوکز (6 گرم بر لیتر)، عصاره مخمر (20 گرم بر لیتر)، تریپتون (10 گرم بر لیتر)، KH2PO4 (2.3 گرم بر لیتر) و K2HPO4 (12.5 گرم بر لیتر) ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﻣﺤﯿﻂ ﮐﺸﺖ ﺑﻬﯿﻨﻪ ﺗﻌﯿﯿﻦ ﮔﺮدﯾﺪ. ﺑﯿﺸﺘﺮﯾﻦ ﻣﻘﺪار ﺗﻮﻟﯿﺪ ﺑﯿﻮﻣﺲ و ﺑﯿﺎن ﭘﺮوﺗﺌﯿﻦ ﻫﺪف در ﻣﺤﯿﻂ ﮐﺸﺖ ﺑﻬﯿﻨﻪﺳﺎزی ﺷﺪه ﺑﻪ ﻣﯿﺰان OD600nm برابر با 5.5 ﺗﻌﯿﯿﻦ شد. ﻧﺘﯿﺠﻪﮔﯿﺮی: نتایج نشان داد که کلون سازی و بیان ژن PapG.AcmA قابل انجام می باشد. همچنین اﺳﺘﻔﺎده از ﻣﻨﺒﻊ ﮐﺮﺑﻦ ﮔﻠﻮﮐﺰ در ﺗﺮﮐﯿﺐ ﻣﺤﯿﻂ ﮐﺸﺖ ﭘﯿﭽﯿﺪه ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﻣﺤﯿﻂ ﮐﺸﺖ LB بیان ﺑﻬﺘﺮی ﻣﯽدﻫﺪ. در نهایت با تخلیص و ارزیابی ایمنی زایی پروتئین نوترکیب، می توان از آن به عنوان یک کاندیدای واکسن استفاده نمود. تفاصيل المقالة

سابقه و هدف: استافیلوکوکوس اورئوس یکی از مهم ترین عوامل عفونت بیمارستانی است و امروزه سویه های مقاوم به متی سیلین شیوع زیادی پیدا کرده اند. هم چنین، توکسین پنتون ولنتین لکوسیدین یکی از عوامل مهم بیماری زا در استافیلوکوکوس اورئوس می باشد. این مطالعه با هدف بررسی مقاومت آنتی بیوتیکی، حضور ژن های مقاومت به متی سیلین و پنتون ولنتین لوکوسیدین در میان سویه های بالینی استافیلوکوکوس اورئوس جداسازی شده از بیمارستان های شهر رشت انجام شد. مواد و روش ها: این مطالعه به صورت مقطعی بر روی 250 نمونه بالینی جمع آوری شده از بیمارستان های مختلف شهر رشت در یک سال (1393-1392) انجام شد. در ابتدا جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس توسط آزمون های میکروبی شناسایی شدند. حساسیت آنتی بیوتیکی آن ها بر اساس روش استاندارد CLSI تعیین گردید. همچنین، برای ردیابی وجود ژن های مقاومت به متی سیلین (mecA) و پنتون والنتین لوکوسیدین (pvl) از واکنش زنجیره ای پلی مراز استفاده شد. یافته ها: از میان 250 نمونه مورد بررسی، 50 جدایه متعلق به استافیلوکوکوس اورئوس بودند. آزمایش حساسیت میکروبی نشان داد که 34 سویه (68 درصد) از جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی سیلین بودند. هم چنین فراوانی ژن های mecA و pvl در بین جدایه های استافیلوکوکوس اورئوس به ترتیب 60 درصد (30 نمونه) و 20 درصد (10 نمونه) بود. نتیجه گیری: نتایج این پژوهش افزایش مقاومت استافیلوکوکوس اورئوس نسبت به آنتی بیوتیک های مختلف را نشان داد. این امر می تواند یک هشدار جدی برای درمان عفونت های ناشی از استافیلوکوکوس اورئوس در منطقه مورد بررسی باشد. تفاصيل المقالة